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韩际奥1 马应杰1 王水红2 秦宝山1 韩丽1
(1.郑州人民医院消化内科 郑州 450002, 2.新乡医学院研究生处 河南新乡 453003)
【摘 要】 目的 探讨钙卫蛋白、钙激活蛋白在结直肠腺瘤组织中的表达及意义.方法 采用免疫组织化学法对结直肠腺瘤组织标本中钙卫蛋白、钙激活蛋白的表达进行检测.结果 钙卫蛋白的表达与患者性别、肿瘤部位、组织类型无关(P＞0.05).钙激活蛋白的表达与患者性别、肿瘤部位、组织类型无关(P ＞0.05).但不同病理异型性之间的差异具有统计学意义(c2等于7.882,P等于0.019).钙卫蛋白和钙激活蛋白表达无关联(r 等于-0.104).结论 钙卫蛋白的高表达及钙激活蛋白的低表达可成为早期预测腺瘤癌变的的分子生物学指标.
【关键词】 钙卫蛋白 钙激活蛋白 结直肠腺瘤 免疫组织化学
【中图分类号】 R735.5 【文献标识码】 A 【文章编号】 1674-0742(2012)03(a)-0013-03
Expression and Significance of Calprotectin and Calcium Actived Protein in Colorectal Adenoma
HAN Jiao1 MA Ying Jie1 WANG Shuihong2 QIN Baoshan1 HAN Li1
1.Department of Gastroenterology, Zhengzhou People Hospital,Henan 450002 China,
2.Xinxiang Medical University,Henan 453003,China
【Abstract】 Objective To investigate the expression of calprotectin and calcium actived protein in human colorectal adenomas.Methods Immunohistochemistry method was applied to detect the expressions of calprotectin and calcium actived protein in colorectal adenoma tissues specimens.Results The expressions of Calprotectin was not related to tumor parts,pathologic type and pathological atypia(P >,0.05).The expressions of calcium actived protein was not related to sex、tumor parts,pathologic type(P >,0.05).However, the difference of different pathological atypia was statistically significant(c2等于7.882,P 等于0.019).Expression of calprotectin was not associated with calcium actived protein(r等于-0.104).Conclusion The high expression of calprotectin and the low expression of calcium actived protein may predict the molecular markerss of canceration in colorectal adenomas.
【Key Words】 Calprotectin,Calcium actived protein,Colorectal adenoma,Imumunohistochemistry
结肠腺瘤是结肠的良性肿瘤性病变,具有癌变潜能,其与结肠癌的关系倍受关注.研究证实大肠癌多起源于腺瘤,腺瘤癌变主要与其组织类型、瘤体大小及上皮异型增生有关.癌变过程是一个多阶段、多基因改变的复杂过程,癌变的时间约需5～10年[1].钙卫蛋白、钙激活蛋白在结直肠癌中的表达国内外已有较多报道,但对结直肠腺瘤组织中这2种蛋白的表达情况报道较少.本研究采用免疫组织化学的方法对结直肠腺瘤黏膜组织中钙卫蛋白、钙激活蛋白的表达情况进行了检测,分析它们在2种组织中表达差异及共同表达情况,探讨钙卫蛋白、钙激活蛋白的表达与结直肠肿瘤发生发展的关系,为结直肠肿瘤的早期诊断、分期及预后等提供指导.
胸腺瘤:欧阳娜娜 一个行走的胶原蛋白
1. 资料与方法
1.1 一般资料
我院2008年11月至2009年11月消化内镜室行结肠镜检查病人患者,共发现结直肠腺瘤61例,其中男31例,女30例.年龄范围7～82岁,平均46.5岁.全部病例均按结肠镜检查常规准备,应用奥林帕斯-240、潘太克斯3500电子结肠镜进行检查.腺瘤部位和大小、形态以内镜下描述为准.其中结肠腺瘤35例,直肠腺瘤26例.内镜下电切或活检的结直肠病理组织标本由2位高年资病理医师进行诊断与分型.腺瘤组织学类型如下:管状腺瘤33例、混合性腺瘤15例、绒毛状腺瘤例12例,锯齿状腺瘤1例.其中非不典型增生36例,不典型增生22例,早期癌变3例.
1.2 方法
1.2.1 标本处理 组织标本均常规经10%中性论文范文溶液固定,酒精脱水,二甲苯透明,石蜡包埋,做4μm连续切片.每例取8张连续切片,其中2张用于HE染色进行病理分型,其余6张分别用于钙卫蛋白和钙激活蛋白免疫组化染色.
1.2.2 主要组化试剂及方法 羊抗人钙激活蛋白多克隆抗体(Santa Cruz公司,美国),SABC(链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物)免疫组化试剂盒及DAB显色试剂盒购自武汉博士德生物工程有限公司.免疫组化采用SABC法进行.鼠抗人钙卫蛋白单克隆抗体购自Thermo公司,免疫组化试剂盒购自天津市津脉基因测绘技术有限公司.采取链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶免疫组化染色方法(S-P法)检测钙卫蛋白的表达.
1.3 Cap43的定量分析及结果判定
钙卫蛋白结果判定:采取已知的阳性切片作阳性对照,用PBS液代替一抗作为阴性对照.细胞浆或胞膜染色强度判定:不着色(-),浅棕论文范文(+),棕论文范文(++),棕褐色(+++).+ — +++细胞数＞ 15%为阳性表达,＜15%为阴性表达.
钙激活蛋白结果判定:阳性对照采用钙激活蛋白高表达的小鼠肾脏作为对照,空白对照用PBS代替特异性一抗.细胞浆或胞膜染色强度判定:不着色(-),浅棕论文范文(+),棕论文范文(++),棕褐色(+++).+— +++细胞数＞5%为阳性表达,＜5%为阴性表达.
1.4 统计学处理
用SPSS 11.5软件包对所得结果进行c2检验或Fisher精确概率检验,以P等于0.05为检验水准.P<,0.05为差异有统计学意义.
2. 结果
2.1 钙卫蛋白、钙激活蛋白在结直腺瘤组织中的表达及与各病理因素之间的关系
钙卫蛋白的表达与患者性别、肿瘤部位、组织类型无关(P ＞0.05).3种病理异型组织的表达差异存在差异,非癌变组(非不典型增生加不典型增生)阳性表达率要明显低于癌变组,但其差异无统计学意义(c2等于5.539,P 等于0.063).钙激活蛋白的表达同样与患者性别、肿瘤部位、组织类型无关(P ＞0.05).但不同病理异型性组织的钙激活蛋白表达率之间的差异具有统计学意义(c2等于7.882,P 等于0.019),与非不典型增生和不典型增生组织相比较,早期癌变组织钙激活蛋白表达率明显降低,见表1.
2.2 钙卫蛋白、钙激活蛋白表达之间的关联性
对同一组织标本同时进行钙激活蛋白及钙卫蛋白的表达情况分布如表2所示.统计显示2种蛋白表达关联系数r等于-0.104,关联无统计学意义(P 等于0.425).
3. 讨论
钙卫蛋白是中性粒细胞和巨噬细胞胞浆来源的含钙蛋白,主要来源于中性粒细胞和单核细胞,具有多种生物学功能,在许多炎症情况下含量增加,可作为急性炎症性标志物.有研究显示在结直肠癌中,粪便钙卫蛋白的含量明显升高[2].钙激活蛋白(calcium actived protein,Cap43)基因又名N-myc下游调节基因,是美国学者Salnikow在研究镍的致癌机理中发现的新基因[3].被认为在多种类型的肿瘤中可作为有效的诊治指标[4].在我们的前期研究中对结直肠癌组织中钙激活蛋白、钙卫蛋白表达进行检测发现2种蛋白的表达与结直肠癌患者的性别、部位及癌组织病理类型、分化程度均无关.但2种蛋白在结直肠正常组织、腺瘤组织和癌组织中表达水平存在着明显差异.钙激活蛋白在结直肠癌组织的表达显著低于结直肠正常组织和腺瘤组织,于此相反,钙卫蛋白在结直肠癌组织的表达显著高于结直肠正常组织和腺瘤组织,并且其实际表达于结直肠癌组织中的间质细胞,主要位于中性粒细胞的胞质中[5～7].本次我们检测对比了结肠腺瘤中2种蛋白的表达,发现2种蛋白的表达与均与结直肠腺瘤患者的性别、部位及组织病理类型无关.但与腺瘤的病理异型性有着密切相关性.发生早期癌变的组织中钙卫蛋白表达率明显升高,而钙激活蛋白表达率显著下降,这种变化趋势与它们在结直肠良恶性肿瘤表达的差异是一致的.提示在腺瘤癌变的早期已经出现钙卫蛋白及钙激活蛋白表达的异常,钙卫蛋白的高表达及钙激活蛋白的低表达可成为早期预测腺瘤癌变的的分子生物学指标.
钙卫蛋白由两条重链14和一条轻链8非共价结合形成异二聚体,每条链可结合2个钙离子,在钙离子存在的情况下具有抗蛋白酶活性,在肠腔和外界环境中长期保持稳定,不被各种酶和细菌破坏.Salnikow[3]等研究镍化合物产生cap43过程中发现,游离钙离子载体A23187刺激cap43基因的大量表达,提示细胞内游离钙离子升高是诱导cap43基因表达的重要原因.作为同样与钙离子相关的蛋白,推测可能存在某种关联,但我们的研究表明,虽然它们在腺瘤的癌变中表现了相反的变化趋势,但这种变化不存在关联性.
参考文献
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[2] Hoff G, Grotmol T,Thiis-Evensen E,et al.Testing fo faecal calprotectin (PhiCal) in the Norwegian Colorectal Cancer Prevention trial on flexible sigmoidoscopy screening:comparison with an immunochemical test for occult blood (FlexSure OBT)[J].Gut 2004,53:1329～1333.
[3] Salnikow K, Blagosklonny MV, Ryan H, et al. Carcinogenic nickel induces genes involved with hypoxic stress[J].Cancer Res,2000,60(1):38～41.
[4] 庄利萍,薛喜筠,高倩,等.NDRG1基因与肿瘤的研究进展[J].实用癌症杂志,2009,24(3):211～212.
[5] 秦宝山,马应杰,王水红.钙卫蛋白在大肠癌中的表达及意义[J].胃肠病学和肝脏病学杂志,2010,19(12):1081～1083.
[6] 王水红,马应杰.大肠癌组织中Cap43蛋白的表达变化及意义[J].山东医药,2010,50(6):55～56.
[7] 马应杰,王水红,韩际奥,等.钙激活蛋白在结直肠癌及结直肠腺瘤中的表达及意义[J].中华消化杂志,2010,9:624～626.
【收稿日期】 2012-01-18
总结：本论文可用于蛋白腺瘤论文范文参考下载，蛋白腺瘤相关论文写作参考研究。
胸腺瘤引用文献:
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